La variole du singe Diagnostic Méthodes
Virus de la variole du singe (MPXV), la variole et la vaccine appartiennent tous à la Orthopoxvirus genre. Virus de la variole du singe est principalement transmis aux humains par les rongeurs, primates et d'autres animaux sauvages, et a humaines limitées-la transmission d'homme à homme, provoquant un rare zoonose virale-la variole du singe. Sur Septembre 1st , 1970,, les premiers cas de MPXV ont été identifiés à Basankusu L'hôpital au Congo. Virus de la variole du singe est principalement transmis aux humains par les rongeurs, primates et d'autres animaux sauvages, et a humaines limitées-la transmission d'homme à homme, provoquant un rare zoonose virale-la variole du singe. Les symptômes cliniques de la variole du singe sont similaires à ceux de la variole, mais les symptômes sont plus doux. La variole du singe principalement eu lieu dans les régions éloignées de Centrale et Afrique de L'ouest, où est près de forêts tropicales. Avec l'adaptation pour les humains, MPXV progressivement évolué en deux clades: Centrale direction générale de L'afrique (Bassin Du Congo) et la direction générale de L'afrique de L'ouest. Parmi eux, le Bassin Du Congo branche a plus forte virulence et la transmissibilité.
Introduction à MPXV
Virus de la variole du singe est un enveloppé virus à ADN double brin, qui est très dépendante sur hôte cellulaire ADN et ARN réplication, et peut reproduire dans le cytoplasme de l'hôte. Similaire à virus de la même genre, MPXV est très probablement à reproduire la morphologiquement distinctes intracellulaire mature virus (IMV) et extracellulaire du virus enveloppés (VEE) dans le cytoplasme de l'hôte. IMVs ont un robuste structure physique qui facilite la transmission entre les hôtes, tandis que le plus fragile Vee sont enveloppés et limite immunitaire liquidation par l'hôte. Donc, Les Vee sont plus approprié pour virus transmission de cellule à cellule. MPXV peut effectivement infecter l'homme primaire monocytes, éliminant local T cellulaire réponses en inhibant CD4 et CD8 l'activation des cellules T, donc que, pour éviter la systémique immunosuppression et surveillance immunitaire.
Diagnostic clinique de la variole du singe virus
Le meilleur diagnostic échantillons pour la variole du singe viennent de lésions cutanées: fluide de vésicules et pustules, et sec croûtes. Lésion des échantillons doit être stocké dans un endroit sec, stérile tubes (comme VTM) et conservé au froid. Le diagnostic clinique de la variole du singe doit envisager d'autres éruption troubles telles que la varicelle, la rougeole, les infections cutanées bactériennes, la gale, la syphilis, et liés à la drogue allergies. Lymphadénopathie chez les premiers stades de la maladie peut être la seule clinique caractéristique qui distingue la variole du singe de la varicelle ou la variole.
1. Electron microscope biopsie
Sous le microscope électronique, MPXV a été en forme de brique dans le cytoplasme, avec corps latéraux, et le noyau central était d'environ 200-300 nm long. Depuis LE VPO caractérisations sont morphologiquement indiscernables, cette méthode ne peut pas confirmer le diagnostic, mais peut suggérer que le virus appartient à la Poxviridae genre.
2. Détection de gènes
2.1. En temps réel fluorescence quantitative PCR
Détection de Routine de MPXV ADN sur des échantillons cliniques et MPXV-cellule infectée cultures, avec méthode PCR ou PCR en temps réel. La détection est recommandé à effectuer dans un niveau de biosécurité 3 installation. PCR en temps réel méthode devrait être utilisé pour détecter le extérieure enveloppe protéines gène (B6R), ADN polymérase gène, la région conservée de E9L, L'ARN polymérase dépendante de L'ADN sous-unité 18, rpo18 et F3L gène.
2.2. Polymorphisme de longueur des fragments de Restriction (RFLP)
PCR ou restriction longueur fragment polymorphisme (RELP) peut également être utilisé pour la détection de MPXV ADN, mais RFLP est du temps et nécessite virus culture. RFLP de produits PCR exige également la digestion suivi par électrophorèse sur gel, qui peut ne pas être la meilleure approche en milieu clinique où la vitesse, sensibilité, et spécificité sont critiques.
2.3. Séquençage de dernière génération technologie (NGS)
Séquençage de génomes complets avec NGS méthode reste l'étalon-or pour différencier MPXV et d'autres orthopoxvirus (VPO) caractérisation, mais la technologie est coûteux et le traitement en aval des les données de séquençage exige une grande puissance de calcul. Donc, L'END peut pas être une démarche appropriée à des ressources-limitée pays en afrique sub-Saharienne. PCR en temps réel est encore la méthode préférée pour le diagnostic de routine de MPXV en tests génétiques et sur leur, mais il doit être complété par sur-site technologie de séquençage du génome. Comme D'oxford Nanopores MinION, il fournit en temps réel génome viral données, qui est essentiel pour preuve épidémiologique à base d'intervention.
3. Immuno assay
La variole du singe virus immunitaire dosage principalement comprennent enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) À détecter IgG/IgM anticorps et immunohistochimique détection de les antigènes viraux. Immunochimiques analyse de MPXV anticorps peut distinguer de l'herpès virus. Antiviraux anticorps et T-cellulaire réponses ont été victimes à augmenter alors que la maladie début, avec la variole du singe virus IgM et IgG détectés dans le sérum autour 5 jours après l'apparition de l'éruption et que après plus que 8 jours. Possible MPXV l'infection devrait être diagnostiquées si IgM et IgG anticorps sont présents dans le sérum de non vaccinés personnes avec une histoire de rash et maladie grave. UN positif IgM ELISA test indique une exposition récente à MPXV, s'il est vrai que IgG test indique que la personne a été précédemment exposés à MPXV grâce à la vaccination ou l'infection naturelle. La présence des deux IgM et IgG dans un échantillon indique avant la vaccination ou l'exposition à personnes naturellement infectés avec MPXV. Toutefois, restriction (rflp) sont sérologiquement croix-réactive, et l'antigène et anticorps essais ne pas fournir confirmation de la variole du singe spécificité, mais peut être possible pour l'épreuve sérologique dans MPXV-les zones d'endémie.
RÉférence:
[1] Sarah Keasey, Christine Pugh, Alexander Tikhonov, et al. Protéomique Base de la Réponse Immunitaire à L'infection Par Le Virus de La Variole Du Singe Examiné in Cynomolgus Macaques et une Comparaison Avec les cas de Variole Humaine vaccination [J]. Plos one, 2010, 5(12): e15547.
[2] Emmanuel Alakunle, Ugo Moens, Godwin Nchind, et al. Virus de la variole du singe au Nigeria: Infection Biologie, Épidémiologie, et L'évolution [J]. Virus, 2020, 12(11):1257.
